Киевская Псалтырь — выдающийся памятник каллиграфии и живописи. О дате создания рукописи сообщается в выходной записи писца: «В лето 6905 [1397] списана бысть книга си Давыда царя повеленьем смиренаго владыкы Михаила рукою грешнаго раба Спиридонья протодиякона. А писана в граде в Киеве» (л. 227). Несмотря на упоминание Киева в качестве места окончания работы над рукописью, исследователи указывают на ее связь с московской книгописной традицией. По предположению Г. И. Вздорнова, писец Спиридоний и епископ Смоленский Михаил в 1397 г. находились в Киеве в свите митрополита Московского и всея Руси Киприана. На московское происхождение писца указывают и языковые особенности рукописи.
Манера исполнения иллюстраций позволяет говорить о работе двух художников, один из которых был ведущим мастером (вероятно, это грек или славянин, обучавшийся в греческой школе), а второй его помощником. Иконография миниатюр восходит к византийским источникам: известен ряд греческих лицевых Псалтырей XI в., запечатлевших подобный комплекс иллюстраций. Однако, примыкая к греческой традиции и отчасти переосмысляя ее, Киевская Псалтырь оказывается в основании соответствующей русской традиции — как самая ранняя в целом ряду русских иллюстрированных Псалтырей (за ней следуют Угличская Псалтырь XV в. и комплекс Годуновских Псалтырей XVI в.).